50+tae新闻后续_50倍tae配置(2024年11月追踪报道)
本科生PCR实验全攻略,注意事项全在这! PCR,全称聚合酶链式反应,是实验室中一种常用的鉴定试验动物基因型的方法,也是本科生学习的第一个基础实验。虽然PCR实验看似简单,但稍有不慎就可能导致结果不显著。本文以小鼠基因型鉴定为例,详细介绍PCR实验的整体流程和一些注意事项。 1⃣️ DNA提取 a) 准备组织样本(如脚趾或尾巴)+ 400 NaOH(确保样本全部浸于NaOH中) b) 100℃水浴20min(每隔5min开盖透气,防止蒸汽使EP管盖弹开) c) 加入40 Tris-HCl,混匀 d) 12000rpm,4℃,2min离心,取上清液,可在4℃储存数周 2⃣️ PCR体系配制 a) 根据目标基因型找到对应的引物,计算PCR体系(体系量应略多于样本数量) 2X Taq 10 F 0.5 R 0.5 RNase-free H2O 7 b) 将所需试剂冰上解冻后,按照计算体系配于EP管中(EP管应做好标记) c) 在八联管盖上做好对应样本的标记,按照18ul体系+2ul DNA加入八联管,并设置一个WT和水样作为对照组 d) 根据目标基因型选择对应PCR程序,扩增DNA 3⃣️ 制备琼脂糖凝胶 a) 2% 琼脂糖凝胶(大胶):1.4g琼脂糖+70ml TAE(或1.6g琼脂糖+80ml TAE),微波炉加热1min,振荡后再加热1min,待溶液中无结晶颗粒后,冷却至40-50℃ b) 按1:20000加入EB核酸染料,摇匀(一定要充分摇匀,否则染料会单独跑出一条条带,而基因型不明显) c) 倒入凝胶托盘,待20-30min凝固。注意不要产生气泡(可以用枪头拨到角落) 4⃣️ 电泳 加入marker和样本各8(根据梳尺大小或绿酶活性酌情增加或减少),最大电流,恒压110V条件下跑胶20-30min,关注marker最前端条带,勿使样本跑出凝胶。 5⃣️ 扫膜 (具体步骤略) 通过以上步骤,你就能顺利完成PCR实验,鉴定出小鼠的基因型啦!
穷学生如何高效自学日语?学姐经验分享! 备考日语的艰辛,只有经历过的人才能体会。作为过来人,我深知盲目摸索的痛苦和不必要的花费。以下是我总结的一些自学日语的经验和方法,希望能帮助到正在努力的你! 𘨀试费用: N1-N2:550元 N3-N5:450元 这是参加考试的必备费用。 考试时间: 7月和12月是考试月份,记得提前规划好复习时间。 娯椹 APP推荐: 词汇:Anki 听力:NHK News Easy 口语:Hello Talk 阅读:Tadoku 写作:HiNative 妗娯椹 网站推荐: New Web Easy:提供新闻、听力、阅读等资源 Lang-8:在线语言交流平台,提升写作能力 声调词典 OJAD:专注于日语语法学习 Tae Kim's Guide to Learning Japanese:免费的日语语法教程,适合初学者 小破站UP主推荐: 出口仁老师:(零基础入门) 周业繁:(真题讲解) 秋山耀平:(地道日语用法) 井上老师:(写作) Hero3046:(考级必刷) 备考物料推荐: 日语学习计划表(全科) 日语五十音字帖+测试卷 新标准日本语(1-6册+练习册) 红蓝宝书(详解+练习) 别笑!我是日语书系列 大家的日语+新完全掌握 N1-N5语法、词汇汇总 考研、考级、高考历年真题+解析 主流教材电子书(100多本) ᥍万不要裸考,合理安排时间,希望这些资源能帮助你顺利备考!
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DNA电泳全解析:从原理到操作步骤 什么是电泳? 电泳是一种利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术。简单来说,就是带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移动的现象。 电泳的原理 DNA分子在琼脂糖凝胶中的泳动速度取决于几个关键因素: 电荷效应:DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷,因此在电场中向正极移动。 分子筛效应:DNA分子的迁移速度与其本身的大小和构型有关,迁移速度与分子量的对数值成反比。通过DNA marker可以判断DNA大小。 其他影响因素:包括DNA分子的大小、构象,凝胶浓度,电压和电泳缓冲液的组成。例如,共价闭环DNA的线状DNA > 开环DNA。 ꠦ需材料 琼脂糖 TAE(电泳缓冲液) 10000㗠GelRed(EB替代物) DNA marker 样本 操作步骤 制备1%琼脂糖凝胶:称量0.25g固体琼脂糖放入锥形瓶中,加入25mL TAE(电泳缓冲液)并摇晃均匀。然后放入微波炉中加热至琼脂糖融化。 胶板制备:当琼脂糖溶液冷却至50Ⰳ左右时,加入2.5uL的GelRed,摇匀后倒入电泳制胶板上。待凝胶冷却凝固后垂直轻拔梳子,将胶板放置在电泳仪器中。 点样:使用移液枪将样品加入小凹槽内。 电泳:将加样后的凝胶板通电进行电泳,一般可以设定为120V电压和30分钟(具体时间根据凝胶浓度和样本大小调整)。 观察:电泳完毕后,在254nm的紫外灯下观察染色情况,并与DNA marker进行对比。 通过这些步骤,你可以轻松分离和检测不同大小的DNA片段,为后续的分子生物学研究打下基础。
RNA琼脂糖凝胶电泳实验全攻略 🠥ꌧ 通过学习RNA琼脂糖凝胶电泳实验,掌握植物总RNA非变性胶电泳的基本原理和方法。 젥ꌥ理 RNA电泳实验可以在变性或非变性条件下进行。非变性电泳通常使用1.0%-1.4%的凝胶,使不同RNA条带分开,但无法判断分子量。变性条件下,RNA的泳动率与分子量对数呈线性关系,可用于测定RNA分子量。快速检测总RNA样品完整性时,普通1%琼脂糖凝胶即可满足实验要求。 ꠥꌦ料与器具 蘑菇的总RNA溶液 电泳仪、电泳槽 电子天平、移液器、枪头 微波炉、紫外透射检测仪 琼脂糖、1XTAE电泳缓冲液 0.5/ml溴化乙锭(EB)10X载样缓冲液 实验步骤 制作琼脂糖凝胶:用1㗔AE电泳缓冲液制作琼脂糖凝胶,加1㗔AE电泳缓冲液至液面覆盖凝胶。 样品准备:在超净工作台上,用移液器吸取总RNA样品4于封口膜上。再加入5 1㗔AE电泳缓冲液及1 的10X载样缓冲液,混匀后,小心加入点样孔。 电泳:打开电源开关,调节电压至100V,使RNA由负极向正极电泳,约30分钟后将凝胶放入EB染液中染色5分钟,用清水稍微漂洗。在紫外透射检测仪上观察RNA电泳结果。 变性琼脂糖凝胶检测 所需试剂: MOPS缓冲液(10x):0.4mol/L;吗啉代丙烷磺酸(MOPS) (Ph7.0);0.1mol/L NaAc;10mol/L EDTA 上样需要的染料:50%甘油;1mol/L EDTA;0.4%溴酚蓝,0.4%二甲苯蓝 甲醛 去离子甲酰胺 砥ꌦ作步骤: 制胶:将制胶用具用70%乙醇冲洗一遍,晾干备用。称取0.5g琼脂糖,置干净的100ml锥形瓶中,加入40ml蒸馏水,微波炉内加热使琼脂糖彻底溶化均匀。待胶凉至60-70℃,依次加入9ml甲醛、5ml 10X MOPS缓冲液和0.5ul溴化乙锭,混合均匀。灌制琼脂糖凝胶。 样品准备:取DEPC处理过的500ul小离心管,依次加入如下试剂:10x MOPS缓冲液2ul,甲醛3.5ul,甲酰胺(去离子)10ul,RNA样品4.5ul,混匀。将离心管置于60℃水浴中保温10分钟,再置冰上2分钟。向管中加入3ul上样染料,混匀。 上样与电泳:电泳槽内加入1XMOPS缓冲液,于7.5V/ml的电压下电泳。电泳结束后,在紫外灯下检查结果。 案例分析 Agarose gel electrophoresis showing total RNA extracted from P. orientalis leaves using five RNA isolation methods: CTAB method (lane 1), SDS method (lane 2), TRIzol method (lane 3), plant RNAout kit protocol (lane 4), and Improved plant RNAout kit protocol (lane 5).
又一家央行宣布降息50bp,都降了#金秋图文激励赛# 新西兰央行在货币政策会议后将基准利率下调了50个基点,第二次连续降息。此次降息使新西兰的利率从5.25%降至4.75%。  (来源:新西兰央行) 8月,新西兰央行意外降息25个基点。该央行当时表示,进一步宽松的步伐将取决于对低通胀环境的信心。央行在本周三的声明中表示,“评估显示,年度消费者价格通胀在1%至3%的通胀目标范围内,并接近2%的中性水平。” 2022年6月,新西兰的年通货膨胀率达到7.3%,为30多年来的最高水平。截止到2024年6月的季度数据显示,通胀率降至3.3%,但仍高于新西兰储备银行1%至3%的中期目标范围。 新西兰储备银行还指出,新西兰的经济活动“疲软”,部分原因是限制性货币政策,“商业投资和消费支出一直疲软,就业状况继续疲软。低生产率增长也限制了经济活动”。因此,降息是“适当的”,以实现并保持低而稳定的通货膨胀,避免产出、就业和新西兰元的不稳定。 本周央行动态 本周三,还有印度央行公布将利率决议。 2024年10月10日,即本周四,美联储公布货币政策会议纪要。同一天,墨西哥央行公布货币政策会议纪要。 2024年10月11日,即本周五,韩国央行公布利率决议。 法国兴业银行经济学家Suktae Oh和Kiyong Seong在一份报告中写道,到2025年底,韩国央行可能将其政策利率下调至多100个基点,至2.50%。他们预计韩国央行将在10月11日的会议上降息25个基点,将利率降至3.25%。 兴业银行认为,无论韩国央行是在10月还是11月启动其宽松周期,市场已经消化了到2025年底降息100个基点的预期。 美联储降息预期降温 芝商所美联储观察工具显示,美联储在11月7日的会议上降息25个基点的概率高达88.8%,不降息的概率为11.2%。在美国9月就业数据发布之前,降息50个基点的概率曾一度超过50%!
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