姬姆萨染色前沿信息_包涵体姬姆萨染色(2024年11月实时热点)
病理切片染色技术服务全解析 病理染色在医学诊断中扮演着至关重要的角色。通过染色,医生可以观察到细胞和组织的微观结构,从而诊断出各种疾病。不同的染色方法可以揭示组织中的不同成分,以下是部分常见的病理染色方法: HE染色 Masson染色 PAS染色 阿利新蓝染色 AB-PAS染色 天狼猩红染色 甲苯胺蓝染色 尼氏染色 肥大细胞染色 油红O染色 番红固绿染色(骨组织) LFB髓鞘染色 茜素红染色 EVG染色 Trap破骨细胞染色 抗酸染色 ALP碱性磷酸酶染色 瑞士姬姆萨染色 Von Kossa染色 高尔基染色(全景扫描) 普鲁士蓝染色 DAB加强法普鲁士蓝染色 苯胺蓝染色 黑色素染色 网状纤维染色 刚果红染色 Glodner三色法染色 维多利亚蓝染色 乳糖苷酶染色 ATP染色 甘氨酸银染色(镀银) 通过这些染色方法,医生可以更准确地诊断疾病,制定治疗方案。
急性臭氧暴露对大鼠肺部细胞遗传毒性的影响是什么? ? 前言 ? 臭氧(O3)是氮氧化物和挥发性有机物的二次污染物。近年来,光化学反应造成的大气O3污染逐渐变得较为严重,其主要来源是光化学烟雾,其次还可来源于消毒过程中紫外灯的使用等。 ? 已有研究表明,臭氧对植物、体外培养的微生物和细胞具有遗传毒性,关于体外培养细胞的研究多集中于对淋巴细胞、 A549细胞系、骨髓细胞等,对体内肺部细胞的遗传毒性研究相对较少,且仅局限于某一个水平探讨引起的遗传毒性。 ?? 将肺组织单细胞悬液涂于干净的载玻片上,自然晾干后,插入含甲醇固定液的槽中固定10 min,取出后放入Giemsa染色液中染色15 min,超纯水冲 洗,晾干,油镜下观察计数。 ? 遵循最常用的方法,即 Z字形方法来筛选载玻片。在每张载玻片上计数 1 000个具有完整细胞核和细胞边界的细胞。从1 000个完整的细胞中计数MN的数量。 ? ?DNA-蛋白质交联实验 ? 取0.5 ml肺组织制备好的单细胞悬液,加入 0.5 ml SDS溶液,轻轻摇匀,65℃水浴加热10 min。 将100 Tris-HCl-KCl溶液加入到上述溶液中。充分混合后,将液体倒入1 ml聚丙烯移液器吸头中, 重复上述步骤7次,使DNA长度一致。 ? 冰上预冷5 min,4℃10 000 r/min离心5 min,将上清液转移到 另一个离心管中保存。向沉淀中加入1 ml洗涤缓 冲液,65℃水浴加热10 min。冰上预冷5 min。4℃,10 000 r/min离心5 min,收集上清到另一离心管中。 ? 向上述沉淀中加入0.5 ml洗涤缓冲液和0.5 ml 蛋白酶K溶液,充分混匀。60℃水浴中加热3 h,冰 上骤冷5 min。4℃,12 000 r/min离心10 min,收集上清。 ? 用洗涤缓冲液制备各浓度的小牛胸腺DNA 溶液1 ml,使其终浓度为0、50、150、250、375、500、 750、1000、1500、2500 ng/ml,分别加入1 ml新鲜制 备的Hoechst33258溶液(400 ng/ml),混合均匀后, 测量各组溶液的荧光强度,绘制DNA浓度标准曲 线。 ? 取上述第三、四步骤中离心管的上清液并加入 1 ml新鲜制备的Hoechst 33258溶液。混合均匀后, 在相同条件下测量荧光值。DNA和蛋白质交联率 计算公式:DNA-蛋白质交联率=交联DNA含量/ (交联DNA含量+游离DNA含量)。 ? 实验结果数据采用均数ⱦ 准差(xⱳ)表达,采 用SPSS 13.0统计软件进行分析,计数数据用卡方检验,计量数据用方差分析(ANVOA)进行比较。 ? 大鼠肺组织内8-OHdG含量 的影响 ? 由于臭氧具有强氧化性,8-OHdG是DNA氧化损伤的产物,通常检测8-OHdG的含量可以反映出 DNA氧化损伤程度。随着臭氧浓度的升高,肺组织 内8-OHdG的含量逐渐升高,0.12 ppm、0.5 ppm、1.0 ppm、2.0 ppm及4.0 ppm臭氧暴露组与对照组相比 均有显著性差异,且在臭氧浓度为4.0 ppm时达到 最大值(P<0.05)。 ? 荧光显微镜下观察,对照组未见拖尾的细胞,只 有完整的头部,表明细胞未发生DNA断裂;臭氧暴 露组均可观察到拖尾的细胞,断裂的DNA游动移出细胞核外,形成尾部,形似彗星。 ? 采用软件分 析图片显示,随着臭氧浓度的增大,0.12 ppm、0.5 ppm、1.0 ppm、2.0 ppm及4.0 ppm暴露组的拖尾数 量及拖尾长度均显著升高(P<0.05)。 ? 大鼠肺部细胞内DNA-蛋白质交联率的变化 ? DNA-蛋白质交联(DNA-protein crosslink,DPC)是指DNA链通过共价键的作用与蛋白质稳定的结 合在一起,是一种较为严重的DNA损伤形式。 ? 与对照组相比,0.12 ppm、0.5 ppm、1.0 ppm、2.0 ppm及4.0 ppm臭氧暴露组大鼠肺部细胞内DNA-蛋白质交 联率均显著性增加(P<0.05),且在2.0 ppm时达到最大值。 ? 急性臭氧暴露对肺部细胞染色体水平的影响 0.12 ppm、0.5 ppm、1.0 ppm、2.0 ppm及4.0 ppm 臭氧暴露组大鼠肺部细胞微核率分别为1.4‰,1. 6‰,2.0‰,2.4‰,3.0‰和3.2‰,微核率的发生与对照组相比均无统计学差异(P>0.05),但均随着臭 氧浓度的升高,微核的发生率增加。 ? 结论 ? 综上所述,急性臭氧暴露对大鼠遗传毒性的影 响,在DNA断裂方面,臭氧浓度越大,断裂损伤越 大,而DNA-蛋白质交联方面,随着臭氧浓度的变化, 出现先升高后下降的趋势。所以,臭氧致肺细胞遗 传毒性方面,不同的水平进行分开检测与描述。
瑞氏-吉姆萨染色法:细胞染色全攻略 瑞氏-吉姆萨染色(Wright-Giemsa Staining)的原理: 瑞氏染料由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成。血红蛋白和嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合呈红色;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性蛋白质,与碱性染料美蓝或天青结合,呈紫蓝色;中性颗粒呈等电状态,与伊红和美蓝均可结合,呈淡紫色。 吉姆萨染料由伊红和天青组成,染色原理与瑞氏染色法基本相同。瑞氏染色法对细胞浆内的颗粒染色效果好,但对细胞核的染色不如吉姆萨染色法。吉姆萨染色法对细胞核着色好,但对胞浆颗粒着色较差,且有时对细胞核着色较深,核结构显示不佳。为兼顾二者之长,常用瑞氏-吉姆萨复合染色法。 用途和目的: 常用于血液涂片、肺泡灌洗液涂片、骨髓细胞涂片、细菌、染色体、组织切片等的染色。标本染色后,相应各类细胞呈现不同的着色,从而达到辨别其形态特征的目的。 染色步骤: 自来水流水缓慢冲洗晾干后的载玻片洗去杂质,注意流水从涂片上方流下,避免直接冲洗细胞; 将载玻片晾干后置于瑞氏染液中染色10分钟; 尽量沥干载玻片,再置于吉姆萨染液中染色4分钟。染色完毕后流水缓慢冲洗载玻片,将多余染液洗去; 载玻片晾干后显微镜下观察。 此法常用于小鼠肺泡灌洗液涂片的染色,其他标本可以根据染色结果适当调整染色时间。 显微镜下细胞的辨别: 红细胞:平均直径7,细胞呈粉红至红色,中央因双凹圆盘结构而呈现空白。 单核细胞:胞体圆至椭圆形,直径12-20,胞浆灰蓝色且稍有粗糙感,半透明似毛玻璃,胞质中常有小空泡。成熟的单核细胞胞核呈肾形、马蹄形、不规则形等,细胞核常有扭曲和折叠感。 淋巴细胞:分大(直径12-15)、小(直径6-9)两大类,圆形或椭圆形,胞质淡蓝色透明,无颗粒或偶有数颗紫红色的嗜天青颗粒。核圆形,直径接近细胞直径80%,染色质呈浓集的团块状。 中性粒细胞:胞体圆形至椭圆形,直径10-15。胞质呈无色或极浅的淡粉红色,弥散分布许多浅红或浅紫的细小颗粒。细胞核形态多样,可呈长杆状,也可为分叶状核,2-5叶不等,叶与叶间有细丝相连。 嗜酸性粒细胞:细胞直径13-15,胞浆中充满嗜酸性颗粒,颗粒粗大整齐,排列均匀紧密,为砖或鲜红色。在染色较深的涂片中,颗粒呈现深橙、棕至咖啡色。细胞核分叶,多为两叶呈眼镜状,颜色为深紫色,偶见3叶。
医学遗传学检验实验报告 实验日期:2024年3月24日 实验项目名称:X染色体标本的制备与观察 实验室名称:402 젥ꌥ理: 在女性体细胞内,有两条X染色体,其中一条是异型,浓缩成小结,经过染色后,在显微镜下可以观察到。 栦料与试剂: 显微镜 玻片 盐酸 Giemsa染色液 磷酸缓冲液 实验步骤: 取材制片:用口腔棉签取材,将棉签上的细胞载于玻片上。 固定:将带细胞的玻片置于甲醇和水的混合液(甲醇:水=3:1)中,气干。 解离:将带细胞的玻片置于5mol的HCl中解离20分钟,然后用自来水冲洗4次。 染色:将玻片置于Giemsa染色液中染色10分钟,然后用流水冲洗。 镜检:在油镜下观察上皮细胞形态,找出X小体。 实验结果与分析: 通过显微镜观察,可以看到X小体的形态和特征,了解其在临床上的意义。 性别鉴定: 通过观察X染色体的形态,可以确定性别。 堁BO血型的基因检测: 通过特定的基因检测方法,确定ABO血型。 实验报告内容: 实验目的 实验原理 实验室用的仪器、材料 实验步骤 实验过程原始记录(数据、图标、计算) 实验结果与分析 通过本次实验,我们掌握了X染色体标本的制备与观察方法,了解了X染色体的形态和特征,以及其在临床上的意义。
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