伊红染色液前沿信息_伊红染色存活率参考值(2024年11月实时热点)
젧᥈片HE染色全攻略:步骤与技巧 苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-Eosin staining),简称HE染色法,是切片技术中常用的染色方法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。 ꠥꌦ꤯取样固定 取新鲜的组织样品,加入4%多聚甲醛组织固定液的EP管中。取样材料应该小而薄,约黄豆粒大小。 脱水 采用梯度酒精浓度法脱水。通常选择50%-60%-70%-90%-95%-100%的浓度梯度,各酒精浓度要求准确。95%以前各步骤脱水1小时,95%和100%均分为两步进行,分别脱水30分钟。实验中常将组织在后一步的95%的酒精溶液中过夜,以便进行脱脂。 透明浸蜡 为了使石蜡更容易进入组织,要对脱水后的组织进行透明处理。将组织依次浸入二甲苯:无水乙醇(1:1)溶液和二甲苯透明样品各30分钟,然后在60℃的石蜡溶液中充分浸泡2小时。 包埋和切片 通过包埋机,将浸泡后的组织块使用蜡液包埋后,放到冷台上凝固。之后使用刀片进行修整,在切片机上固定好后进行连续切片(5um)。所得的切片用银子在42℃温水中展开,之后固定在载玻片上,经40Ⰳ烘干后进行HE染色。 HE染色 HE染色的程序如下: 浸入二甲苯ⅠⅡ,95%酒精,90%酒精,80%酒精,70%酒精各15分钟。 二甲苯:100%酒精(1:1),100%酒精Ⅰ,50%酒精,蒸馏水各2分钟。 苏木精染液5-10分钟,水洗后分化入1%盐酸酒精5秒,自来水10分钟。 1%氨水蓝化,自来水,50%,70%,80%,90%和95%酒精各2分钟。 伊红染液5分钟,95%酒精,100%酒精ⅠⅡ,100%酒精:二甲苯(1:1),二甲苯I、各2分钟。 中性树脂封片,不应该等切片上的二甲苯干了再封固。 通过以上步骤,即可完成HE染色,观察到细胞核和细胞质的清晰染色效果。
伊红染液 在组织学、胚胎学和病理学领域,HE染色法是一种广泛使用的染色技术,它能够清晰地显示组织切片中的细胞和组织结构。좜芊染色原理: 细胞核染色:苏木精作为碱性染料,与细胞核内的DNA等带负电荷的物质结合,使细胞核呈现美丽的蓝色。 细胞浆染色:伊红作为酸性染料,在特定pH条件下与细胞浆结合,赋予细胞浆红色或粉红色的外观。 分化作用:通过盐酸乙醇分化液去除过多的染色剂,确保染色效果清晰。 返蓝作用:使细胞核从红色恢复为蓝色。 染色注意事项: pH值控制:对于固定时间较长的组织,需要适当处理以确保细胞核着色良好。 分色时间:严格控制分色时间,以达到细胞核清晰而细胞质基本无色的效果。 酒精脱水:脱水必须彻底,以避免出现白色不透明状态。 防止干燥:避免切片干燥,以免影响神经元形态。 污染预防:定期过滤染液和试剂,防止切片被污染。 冬季加温:在冬季低温时,适当加温二甲苯以确保脱蜡完全。 封片技巧:使用中性树脂封片,盖片要合适,树脂浓度适当且不能有气泡。 常见问题解析: 细胞核、细胞质染色均淡:可能是苏木素染色液和伊红染色液浓度过低或染色时间过短。解决方法:适当提高染色液浓度并延长染色时间。 切片部分区域不着色:可能是组织切片在染色过程中部分区域干燥,或者切片上有油脂等污染物。解决方法:染色时保持切片湿润,并在切片前做好清洁处理。 伊红染色过深:伊红染色液浓度过高或染色时间过长。解决方法:适当稀释伊红染色液或减少染色时间。 切片易脱落:可能是载玻片不干净、黏附剂使用不当或烤片温度不够。解决方法:确保载玻片清洁并正确使用黏附剂、保证烤片温度。 通过这些步骤和注意事项,HE染色法能够提供清晰、准确的组织结构图像,为科研和诊断提供有力支持。
숅染色实验问题大揭秘! 你是否在HE染色实验中遇到过各种问题?别担心,这里为你揭秘常见问题及其解决方案! ⠦色不均匀? 可能是因为组织太厚或固定时间过长。试试剖开组织固定,并确保切片厚度均匀哦! 片染色模糊? 可能是脱蜡前未烘烤或脱蜡时间不够。记得烘烤切片,并使用新鲜的脱蜡液。 染色液不足或组织干涸? 确保染色液足够,并保持组织湿润。如果干涸,可以尝试重新染色。 细胞核染色过浅? 可能是苏木素染液停留时间短或苏木素失效。重新染色,并调整停留时间。 𑠥片有大白色斑块? 可能是脱蜡前烤片温度低或时间短。确保烤片条件适当,并定期更换脱蜡溶剂。 伊红染色较淡? 可能是切片在苏木素染液中停留过长。适当减少停留时间,并确保伊红染色液和时间适当。 遵循这些解决方案,你的HE染色实验一定会更上一层楼! 熟练掌握染色技术,注意细节,高质量染色结果就在眼前!
숅染色组织切片制作全攻略슰 HE染色,即苏木精-伊红染色法,是生物医学领域的经典染色技术。想要掌握它?跟着这个攻略,一步步来! 1️⃣ 切片准备ꊊ* 确保切片厚度均匀,无皱褶或破损,这样染色后观察更清晰。 * 脱蜡是关键!彻底脱蜡能避免切片着色不均,影响观察效果。 2️⃣ 染色液管理ꊊ* 新旧染色液染色时间不同,要根据切片数量和染色液状态来调整。 * 定期更换染色液,如苏木精、伊红等,保持染色效果。 * 调节pH值也很重要,影响细胞核着色。 3️⃣ 染色过程控制 * 苏木精染色时间要适中,根据苏木精的PH值、成熟度和室温来定。 * 伊红染色要快速,根据切片数量逐步延长染色时间。 * 蓝化过程不可少,确保细胞核显示更清晰。 4️⃣ 冲洗与封固* 染色后用清水或适当溶液冲洗切片,去除多余染料。 * 封固时选中性树脂,避免褪色,注意封固时无气泡。 5️⃣ 其他注意事项⚠️ * 避免切片干燥,影响观察效果。 * 妥善保存染色试剂,避免污染和失效。 * 严格遵守实验室操作规范,确保结果准确可靠。 掌握这些技巧,你就能制作出高质量的HE染色组织切片啦!为科研工作添砖加瓦!
젧᥈片HE染色实验全攻略 젧𛇥 埋步骤: 乙醇脱水:将组织依次浸泡在70%、80%、90%、95%和100%的乙醇中,各40分钟。注意,骨性和钙化组织需在脱钙液中浸泡24小时。 透明处理:将组织依次浸泡在三个二甲苯中,各1小时。 浸蜡:将组织依次浸泡在三个石蜡缸中,各1小时。 包埋:将液态石蜡倒入模具盒中,将浸好蜡的组织块平放底部,切面朝下,待石蜡凝固后去掉包埋框,完全冷却后修整蜡块。 ꠥ片制作: 将预冷的蜡块固定在石蜡切片机上,使蜡块的切面与刀口平行,刀的倾斜度通常为15度。 调节切片厚度为4微米,切成厚度均匀的切片。 用毛笔轻轻托起切片,放入展片箱中,水温控制在45度左右,待摊平整后捞片。 将切片贴附在载玻片上,放置在65度的烤片机上烤1小时,再放入烘箱内烘烤2小时。 石蜡切片脱蜡至水: 将石蜡切片依次放入二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中各10分钟,再放入无水乙醇Ⅰ、Ⅱ中各5分钟,然后依次放入90%、80%、70%和50%的酒精中各5分钟进行梯度脱蜡。 蠈E染色: 将石蜡切片放入苏木素染液中染色0.5-1分钟,自来水漂洗。 用1%盐酸酒精分化数秒,自来水漂洗。 用1%氨水返蓝1分钟,流水冲洗数秒。 放入伊红染液中染色数秒,流水漂洗。 脱水封片: 将石蜡切片依次放入75%和85%的乙醇中各2分钟,再放入无水乙醇中5分钟两次。 将切片从二甲苯中取出,用中性树胶封片。 结果判读: 细胞核为蓝色,细胞质为红色。
숅染色组织切片制作指南 젦了解HE染色组织切片的制作流程吗?跟着我们的步骤,一步步来! 株*实验准备**: 1️⃣ 主要器材:脱水机、包埋机、病理切片机、冻台、组织摊片机、正置光学显微镜和成像系统。 2️⃣ 必备试剂:无水乙醇、二甲苯、通用型组织固定液、环保型脱蜡液、中性树胶、苏木素-伊红(H&E)染液和高清恒染试剂盒。 ꠪*组织切片制备**: * 从病理组织取材并进行固定。 * 使用包埋机进行包埋,然后切成薄片。 **染色步骤**: 1️⃣ 脱蜡与水化:将切片依次放入脱蜡液和不同浓度的酒精中,最后用水冲洗。 2️⃣ 预处理:用高清恒染预处理液处理切片。 3️⃣ 苏木素染色:让切片在苏木素染液中染色,然后进行分化和返蓝处理。 4️⃣ 伊红染色:用伊红染液对切片进行染色。 5️⃣ 脱水与封片:通过一系列脱水步骤,最后用中性树胶封片。 **结果判读**: * 细胞核应为蓝色,细胞质为红色。 **操作要点**: * 注意细胞核的分化程度,确保染色效果。 * 定期检查苏木素和伊红的效价,及时更换。 现在,你准备好开始你的HE染色实验了吗?ꢜ耀
HE染色:组织学实验的经典染色法 芥大家好!今天我们来聊聊HE染色,这可是组织学、胚胎学和病理学研究中的老大哥了。HE染色法其实就是在石蜡切片技术中常用的染色方法之一。它用苏木精染液和伊红染料来给细胞和组织着色,具体来说,苏木精染液是碱性的,主要让细胞核内的染色质和胞质内的核酸变成紫蓝色;而伊红则是酸性染料,主要让细胞质和细胞外基质中的成分变成红色。 HE染色的特点嘛,首先是它能在长期保存的情况下保持清晰度,不容易产生沉淀和金属颗粒。其次,它的应用范围非常广,可以用在人、动物、畜牧、水产等各个领域。无论是组织石蜡切片、冰冻切片还是组织细胞的染色,都能用它搞定。而且,苏木素染色液还能重复使用,真是经济实惠。 说到实验步骤,其实也不复杂。首先,你要准备好你的石蜡切片,然后依次用苏木精染液和伊红染料进行染色。染色完成后,再用酒精和水进行脱水处理。最后一步就是封片了,用中性树脂将切片封好,这样你的HE染色切片就完成了! 当然啦,做实验的时候还是要多加注意一些小细节。比如,染色时间不能太长也不能太短,不然颜色会不均匀。还有,脱水处理的时候要注意酒精的浓度和时间,不能让切片变得太干或者太湿。 总之,HE染色法虽然简单但非常实用,是每个实验室都必备的技术之一。希望这篇文章能帮到你们,如果有任何问题或者想法,欢迎大家在评论区交流哦!
숅染色组织切片制作指南 절E染色,全称苏木精和伊红染色,是生物医学中的经典染色技术。 苏木精,碱性染料,将细胞核等嗜碱性结构染成蓝紫色。 ❤️ 伊红,酸性染料,将细胞质等嗜酸性结构染成粉红色。 制作步骤要严格: 1️⃣ 组织切片脱蜡要彻底,否则染色难。 2️⃣ 苏木素染液要定期过滤,防止沉渣。 3️⃣ 染色时间要适中,观察显微镜调整。 4️⃣ 分化步骤关键,避免染色不匀。 5️⃣ 还原液浓度要适中,避免组织脱落。 6️⃣ 伊红染色要轻柔,避免胞核模糊。 7️⃣ 脱水、透明要彻底,避免雾状膜。 8️⃣ 封固剂要适量,避免气泡产生。 9️⃣ 切片要妥善保存,避免阳光直射。 终,一张优质的HE染色切片应呈现细胞核蓝、胞浆红、红细胞桔红的清晰形态。 HE染色,病理诊断的基石,每一步都需精确控制。
짟᥈片制作全攻略ꊰ笨木精-伊红染色法,简称HE染色,是切片技术中的经典染色方法。苏木精染液让细胞核和核糖体呈现紫蓝色,伊红则使细胞质和细胞外基质染成红色。 实验步骤来啦: 1️⃣ 取样固定:新鲜组织样品加入4%多聚甲醛组织固定液中,材料要小而薄哦。 2️⃣ 脱水处理:用梯度酒精脱水,50%-60%-70%-90%-95%-100%,每步都要准确哦! 3️⃣ 透明浸蜡:用二甲苯和无水乙醇混合液及二甲苯透明样品,再在60℃石蜡溶液中浸泡2小时。 4️⃣ 包埋切片:通过包埋机将组织包埋在蜡液中,凝固后修整并切片,厚度5微米。 5️⃣ HE染色:切片经过一系列酒精和二甲苯的浸泡,再在苏木精染液中染色5-10分钟,最后用伊红染液染色5分钟。 完成啦!你的石蜡切片已经准备好进行HE染色了,是不是很有趣呢?记得做好后给我尝尝,让我看看你的手艺如何!
细胞HE染色全攻略:从原理到步骤 ### 一、实验原理 苏木素-伊红染色法(HE染色法)是细胞学中最经典的染色方法之一。它利用两种染料——碱性染料苏木素和酸性染料伊红,分别与细胞核和细胞质发生化学反应,从而在光镜下清晰地呈现出细胞的微细结构。这个过程既有化学反应,也有物理作用。 从化学反应来看,组织细胞内含有酸性物质和碱性物质。细胞的酸性物质与碱性染料的阳离子结合,而细胞核的碱性物质与酸性染料的阴离子结合。因此,酸性细胞核被碱性的苏木素染成蓝色,而碱性的胞浆被酸性染料伊红染成红色。 从物理现象来看,主要有吸附和吸收之说。HE染色提供良好的核浆对比染色,是细胞化学染色最常用的一种方法。 二、实验用品 ꊥ液:常用95%乙醇和冰丙酮 苏木精染液:称取苏木精粉0.5g,铵矾24g溶解于70ml蒸馏水中,然后取NaIO31g,水5ml,再加入甘油30ml和冰醋酸2ml,混合均匀,滤纸过滤,备用。 伊红染液:称取0.5g水溶性伊红染液,溶于100ml蒸馏水中。 稀盐酸乙醇溶液:用75%乙醇配制1%盐酸。 系列浓度的乙醇、二甲苯、中性树胶。 培养瓶、培养皿、眼科镊、盖玻片、载玻片、显微镜。 三、实验步骤 슦 𗥓制备:对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1㗱05/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS洗涤3次。 样品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗涤2次,每次1min。 染核:苏木素染液染色2-3min,自来水洗涤。 分色:镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,自来水洗涤。 染胞质:浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤。 吹干或自然晾干细胞爬片后,中性树胶封片。 若细胞用4%多聚甲醛固定,则染色时间相应延长,苏木素染色12-15min,伊红5min即可。
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